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疑似霉菌毒素污染饲料及原料样品采集方法

时间:2016-04-21来源:必威【betway】官方网站生物点击量:

     霉菌毒素广义上的检测,应该包括取样、制样和分析三步。由于霉菌毒素的污染具有极不均匀性分布而且在农产品中的存在是基于“μg/kg”水平,最终样品的检测值是不能完全代表最初样品的真正含量,上海必威【betway】官方网站生物科技有限公司真菌毒素检测服务中心已经实现了对原料及成品黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、T-2毒素的抽样检测。霉菌毒素样品采集方法、采集数量对检测结果都有一系列的影响,要保证检测结果的客观性,因此要缩小各环节对检测的影响,是日常分析检测应该注意的事项。
      在常规样品采集过程中,采样方法、采样数量和样品质量直接决定检测结果的准确性和检测结论的科学性。因此,对采样人员及采样方法、技术都有特定的要求。例如:采样人员必须是兽医技术人员且应熟悉采样器具的使用,掌握正确的采样方法。现就采样过程中需要注意的事项谈几点自己的意见:
      1、饲料及饲料原料中含有丰富的蛋白质、淀粉、维生素等营养物质,加之有利的霉菌生长环境,则很容易滋生霉菌等微生物而引发饲料及原料的的霉变。饲料及原料霉变引起的资源的浪费是一项世界性的难题,农作物在田间、收获、加工、存储过程中极易感染霉菌。在日常生产过程中,对原料及成品的质量监控,必威【betway】官方网站没有办法做到全部检测,只能对其进行抽样检测。检测过程中取样、制样和分析3个步骤中都不可避免地存在着误差。其中,取样环节产生的误差最大,占总误差的85%以上,而制样与分析2个环节共占总误差的15%以下。在取样过程中通常采用四分法取样,将样品磨粉,过筛网,然后混合,平铺成圆形,分成4等分,取相对的2份混合,然后再平分,减取样约200g,粉碎过25目筛后,装入样品袋,贴好标签备用。对于水分含量较高的样本,立即于65℃烘箱中烘干至恒重,然后按上述方法制成风干样本备用。
      2、样品粉碎细度对检测结果是否有影响?真菌毒素取样的关键点是什么?
      样品的粉碎其目的更重要的是将基质混匀,以提高样品的代表性,通常推荐粉碎细度达到75%过20目即可,但要确保样品混合的均质性。真菌毒素取样的关键包括以下几点:
      1) 使用适当的取样工具;
      2) 使用适当的取样方式在储存地点收集样品;
      3) 适当的取样量;
      4) 在样品分析前应用纸袋或布袋储存在干燥凉爽的地方,以避免微生物或霉菌的生长;
      5) 送至实验室中检测的样品成品至少0.5公斤;原料至少1公斤;
      6) 全部样品粉碎后,进行二次取样。 
      3、外观判定的误导性
      1)即使看不见霉菌,也可能有霉菌毒素(有可能是作物在田间感染霉菌存留的霉菌毒素);
      2)不经过实验室的分析检测,不能正确的判定饲料及原料是否受霉菌毒素污染;
      3)不能单纯的检测饲料及原料中霉菌的含量来评判其霉菌毒素的含量;
      4)霉菌毒素作用具有协同性,通常往往饲料及原料含量多种霉菌毒素,所以在检测的时候不能只关注黄曲霉毒素;
      5)在疑似霉菌毒素超标的样品,要建立正确的样品取样方法。
      4、在正常生产中由于饲料及原料产量大,库存大这样就会造成霉菌毒素检测取样困难的难题,不恰当的取样方法往往不能客观的反应整体霉菌毒素污染情况。

 霉菌毒素污染样品采样方式
      5、样品检测过程中都会存在哪些误差
      在样品分析检测过程中,误差主要存在在料堆、取样、分析这三个过程当中,在以往的研究经验和文献报道中,各个环节误差大体呈现以下图表分布:
 霉菌毒素污染样品误差来源分析
      6、样品分析检测过程中的单位问题“ppb、ppm”
      在当必威【betway】官方网站拿到样品分析检测报告的时候,通常霉菌毒素的单位会标识为ppb或ppm,不是专业的负责质量管理的工作人员,通常会不理解这个单位代表的什么意思,报告中的数值代表霉菌毒素含量是高还是低,那么现在就对霉菌毒素的浓度单位做一个解释。
      1ppm=1毫克/千克=1000ppb=1000微克/千克=1克/吨
      1ppm量化来说相当于,每一吨饲料或原料里含有霉菌毒素的量是1克。
      7、取样的原则
      样品选取一定要具有代表性,在对不同样品进行取样时,要参考相应的推荐方法进行样品的选取,因为必威【betway】官方网站要相信不恰当的取样,经检测得到的检测结果一定是不恰当的,这样检测所提供的信息往往是不正确的。
      经过查阅文献及实验验证,我认为取样主要原则应有一下几个方面:
      1)取样的时候要做到多点、随机、均匀,使得每个部位都有相同的概率被取到。
      2)取样的点数,FAO和WTO建议没200公斤物料取样一次,如果索取样品是比较均匀的物料,可以适当的减少取样点数,在实际工作中由于人力、物力有限,所以在实际操作中取样点数应根据企业实际情况以及物料情况来确定取样点数。
      3)取样量,原料送检样品取样成品应在500g,原料样品应在1000g,这样可以保证检测的最低检测量和检测样品的霉菌毒素的分布均一性。 
      8、取样的方法
      1)流动物料取样,适用于运输卡车、火车、轮船散装物料卸料时;筒仓物料存储取样口取样;饲料企业打包出料扣取样。
      2)饲料生产过程取样,在出料扣安装自动采样设备或者采用鹈鹕嘴取样器取样。
      3)仓储饲料取样,对已经进入仓库的饲料,按照袋装物料的采样程序进行取样。
      4)养殖场饲料及原料取样,饲料样品从料槽中中采样,每个料槽采样量在500g,料槽应该随机性选择;原料样品应该从存储袋中按照多个采样点取样,每次取样1000g。
      9、成品料温超标时,可从以下操作、设备方面逐个排除可能的原因。操作上可能的原因有以下几种:
      1)制粒机喂料转速有可能过快;
      2)制粒本身的调质温度过高;
      3)成品含粉率偏高影响冷却效果;
      4)冷却风机还未完全转换己将成品打入冷却器;
      5)停机时冷却不到位手动排料过快;
      设备上可能的原因则有以下几种:
      1)冷却风档可能开启得太小;
      2)冷却风机风叶是否积尘严重、有无存在破损现象;
      3)冷却器周壁、冷却风管破损存在跑风现象;
      4)冷却风机存在缺相;
      5)料位器位置放置太高或太低、有无卡料现象;
      6)冷却分料板分料是否均匀;
      7)排料栅栏间隙调整得过太、停止时是否会完全重叠;
      8)冷却关风器有无堵塞;
      9)冷却排料时间设置得太短;
      10)冷却器本身的产能功率是否与制粒主机相匹配。
      10、霉变容易引起饲料及原料的严重浪费,并同时会对畜禽的健康造成严重的危害,所以防霉、脱霉是饲料及养殖企业应当重视的首要问题,主要防范措施有:
      1)控制原料的含水量,用于饲料加工的原料水分含量不应超过11.5%。
      2)饲料包装袋做到密封性良好,饲料及原料存放仓库要保持干燥和通风良好,一般霉菌孢子在7℃条件下即可萌发生长,在20-30摄氏度的时候迅速增殖,从湿度上讲,大多数霉菌在相对湿度80%以上时,生长旺盛,因此在保存时要保证环境温度小于7℃,相对湿度控制在75%以下。
      3)添加防霉剂和脱霉剂
       通常温度环境温度高于7℃,相对湿度控制在75%以上时就需要使用防霉剂,尤其是在温度和湿度相对较高的季节。 
      4)建立霉菌毒素检测计划


      上海必威【betway】官方网站生物饲料及原料中霉菌毒素快速定量检测方案--10min快速定量


    上海必威【betway】官方网站生物基于全球领先的荧光定量POCT技术平台,在国内率先推出了霉菌毒素荧光定量检测试纸条,本产品可在10min快速定量的检测出大麦、小麦、面粉中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素A、伏马菌素、T2毒素等真菌毒素的残留含量,样品前处理简单(仅需8min),检测操作简便,采用荧光免疫定量分析仪读数,结果准确可靠且可现场打印,准确性符合HPLC法的检测结果,适用于各类饲料加工企业及检测机构。

霉菌毒素荧光定量检测试纸条原理图
     上海必威【betway】官方网站生物Femdetection®霉菌毒素系列荧光定量检测试纸条性能

必威【betway】官方网站生物真菌毒素系列荧光定量检测试纸条性能

      检测所需配备的仪器和耗材

霉菌毒素检测试纸条所需设备及耗材

      样品前处理过程

霉菌毒素荧光定量检测试纸条样品前处理

      检测操作过程

霉菌毒素荧光定量检测试纸条操作过程

      结果判读和输出
      所有产品均采用便携式荧光免疫定量分析仪进行读数,使得检测结果更加准确、客观,避免人为的误判。
1、阴性(-):检测结果<cutoff值(cutoff值可根据客户的判断标准进行调整),结果为阴性;
2、阳性(+):检测结果≥cutoff值(cutoff值可根据客户的判断标准进行调整),结果为阳性;
3、 无效:读数仪报错,则本次检测无效,需重新测试;
4、 检测结果将呈现于荧光读数仪液晶显示屏上,同时可按打印键打印获得纸质的检测报告,另外,开通仪器的WIFI数据上传功能后,检测相关数据信息将自动上传至“食品安全溯源管理云平台”,便于溯源及质量管理。

霉菌毒素荧光定量试纸条读数仪
      必威【betway】官方网站生物Femdetection®霉菌毒素系列荧光定量检测试纸条产品亮点 
       10min快速定量:集胶体金快速检测、酶联免疫定量检测、色谱质谱准确检测的特点于一身,实现10min内真菌毒素的快速准确定量检测,检测结果可现场打印;
       内置定量标准曲线:仪器内置标准曲线,无需检测时再做标准曲线,既节省了成本,也避免了操作人员与真菌毒素的接触,保护操作人员的安全;
       随到随检:对检测样本量无要求,既可单个或少量样本随到随检,也可大量样本同时检测,并可实现现场检测;
       试剂全配:试剂盒中已配套所有试剂,无需检测人员配制任何溶液,也无需对检测样本进行任何pH的调节;
       配置要求低:对配套的仪器设备及人员要求低,最低仪器配置仅需1台天平、1把100ul和1ml移液器即可,操作人员仅需短期培训就能熟练掌握;
       远程网络支持:仪器可通过网络自动进行标准曲线读取、软件升级、问题故障诊断、质量控制等;
       性价比高:花胶体金试纸条的价格,获得色谱质谱检测的质量和结果,并且节省人力物力,大幅降低检测费用;

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